Western blot en Diabetes Gestacional

Tema: Receptor de detección de calcio en embarazos complicados por Diabetes Mellitus Gestacional

Los bebes nacidos de madres con Diabetes Gestacional experimentan varias complicaciones, incluida la hipocalcemia posnatal. En este estudio se investiga la asociación entre el receptor sensor de calcio (CaSR) y la hipocalcemia neonatal observada en embarazos con DMG.

Métodos: la expresión placentaria de CaSR se evaluó con inmunihistoquímica y Western Blot. Se evaluaron tres polimorfismos de un solo nucleótido CaSR, A986S, R990G, Q1011E, en el ADN genómico del neonato. El suero de Ca, P, Mg, 25 (OH) D Y PTH se midieron en sangre del cordón y en el segundo día de vida.

Western Blot: los tejidos placentarios se homogeneizaron en un tampón de lisis con un contenido de b- mercaptoetanol como reactivo reductor. El Gránulo de proteína se disolvió en urea 8M y se sometió a centrifugación. Las muestras se cargaron en un gel de SDS-PAGE al 8%. Membrana de nitrocelulosa Protan se utilizó para la transferencia de proteínas y CaSR se detectó utilizando un anticuerpo específico.

Conclusiones: CaSR está sub-expresado en DMG en comparación con placentas saludables. El CaSR placentario ejerce un efecto local en la homeostasis del Ca del feto, que se disocia de su contribución a la regulación de la homeostasis del Ca en la vida posnatal.

Referencias: https://www.placentajournal.org/article/S0143-4004(14)00193-3/pdf